THP-1细胞（人单核细胞白血病细胞）是免疫学、肿瘤学和药物研发中的明星工具，尤其在分化为巨噬细胞后应用广泛。然而，这种“娇气”的细胞对培养条件极为敏感，稍有不慎就会导致实验数据偏差甚至全军覆没。以下总结了培养THP-1时需重点监控的细胞状态及应对策略，助你轻松避坑！

一、细胞密度：过高或过低都是雷区

1. **密度过高的风险**  

   - **现象**：细胞聚集成团、培养基变黄、镜下可见大量漂浮碎片。  

   - **后果**：过度拥挤会诱导自发分化或凋亡，影响后续实验（如PMA诱导分化效率降低）。  

   - **解决**：保持细胞密度在**2×10⁵~8×10⁵ cells/mL**之间，每2-3天传代一次，传代比例建议1:3~1:5。

2. **密度过低的隐患**  

   - **现象**：细胞增殖缓慢、培养基长时间保持鲜红色。  

   - **后果**：生长因子不足导致细胞停滞，长期低密度可能引发遗传漂变。  

   - **解决**：传代时保留部分旧培养基（10%-20%）以提供必要因子，或添加新鲜配制的含10% FBS（推荐：SERANA B级胎牛血清 FBS-UE500）的RPMI-1640。

-二、形态异常：健康状态的“晴雨表”

-1.正常状态**：悬浮生长，呈单个圆形或略椭圆形，折光性强，边缘清晰。  

-2.异常信号**：  

  - **贴壁细胞**：提示自发分化（可能与血清批次或细胞老化有关），需及时吹打悬浮并更换优质血清。（推荐：SERANA B级胎牛血清 FBS-UE500）  

  - **颗粒增多或空泡化**：可能因代谢压力或污染（如支原体），需检测培养基pH并排查污染。  

  - **碎片增多**：离心后观察沉淀量，若碎片占比＞30%，需重新复苏健康细胞。

三、污染防控：隐形杀手不容忽视**

1. **支原体污染**  

   - THP-1对支原体高度敏感，定期用PCR或荧光染色法检测，培养时添加1%双抗（青霉素-链霉素）。  

2. **真菌/细菌污染**  

   - 培养基浑浊或出现絮状物需立即丢弃，并对培养箱进行全面消毒。

四、分化实验前的关键准备**

若需诱导分化为巨噬细胞，需确保：  

- **细胞处于对数生长期**（活力＞95%）。  

- **避免频繁换液**：换液过多会去除细胞分泌的自生长因子，建议每3天半量换液。  

- **血清批次一致性**：不同批次血清可能含未知分化诱导成分，选定批次后勿随意更换。

五、冻存与复苏：拯救你的细胞

- **冻存秘籍**：使用对数期细胞，(建议使用：SERANA无血清细胞冻存液 WXQA100)  无需程序降温，直接冻于-80℃后转入液氮。  

总之：THP-1细胞的“喜怒无常”是出了名的，但只要掌握其状态变化的规律，严格监控密度、形态和培养环境，就能让它成为你实验的得力助手。记住：定期记录细胞生长曲线、做好批次对照，才是实验可重复性的黄金法则！